Pcr仪结束扩增的正确方法及注意事项

PCR仪是一种在生物医学领域中广泛应用的高通量聚合酶链反应技术。PCR技术具有高度灵敏度和特异性，可以用于检测极其微量的目标DNA序列。然而，在进行PCR实验时，如何正确地结束PCR扩增过程是一个关键问题。本文将介绍几种常用的方法来结束PCR扩增过程。

1. 温度降解除法：PCR扩增结束后，可以通过降低反应混合物的温度来终止PCR扩增过程。通常，将反应混合物置于冰水中，然后缓慢冷却至室温。这种方法简单易行，但需要注意避免过度降温导致样品冻坏。

2. 化学终止剂：在PCR扩增过程中，可以使用一些化学终止剂来终止扩增过程。例如，在PCR反应体系中添加甲醛、丙酮酸等化学物质，可以使反应混合物中的DNA链断裂，从而终止扩增过程。这种方法操作简便，但需要注意选择合适的化学终止剂，避免对样品造成影响。

3. 酶切终止：在PCR扩增过程中，可以使用一些限制性内切酶来切割DNA链，从而终止扩增过程。常用的限制性内切酶包括BamHⅠ、SacⅠ等。这种方法具有高度的特异性和灵敏度，但需要注意选择合适的限制性内切酶，避免对样品造成影响。

4. 核酸杂交终止：在PCR扩增过程中，可以使用一些核酸杂交技术来检测扩增产物的完整性。例如，在PCR反应体系中加入放射性标记的核酸探针，可以通过检测探针与扩增产物之间的杂交情况来判断扩增是否完成。一旦探针与扩增产物完全杂交，即可停止PCR扩增过程。这种方法具有高度的特异性和灵敏度，但需要注意选择合适的核酸探针，避免对样品造成影响。

5. 电泳终止：在PCR扩增结束后，可以通过电泳技术来检测扩增产物的完整性。常用的电泳技术包括琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。通过观察电泳结果，可以判断扩增是否完成。一旦观察到扩增产物，即可停止PCR扩增过程。这种方法具有高度的特异性和灵敏度，但需要注意的是